Introduzione
L'elettroforesi di gel hè una tecnica fundamentale in a biologia moleculare, largamente usata per a separazione di proteine, acidi nucleici è altre macromolecule. U cuntrollu propiu di u voluminu di mostra, a tensione è u tempu di l'elettroforesi hè cruciale per ottene risultati precisi è riproducibili.U nostru cumpagnu di laboratoriu pruponee migliori pratiche per a gestione di questi parametri durante l'elettroforesi di gel SDS-PAGE.
Pechino Liuyi Biotechnology prudutti elettroforesi gel
Sample Volume: Assicurendu a cunsistenza
Quandu si esegue l'elettroforesi SDS-PAGE, u voluminu di mostra hè un fattore chjave chì pò influenzà significativamente a risoluzione di i vostri risultati. Si consiglia generalmente di caricare 10 µL di proteina totale per pozzetto. Per assicurà a coerenza è impedisce a diffusione di mostra trà i pozzi adiacenti, hè impurtante di carricà un voluminu uguale di buffer di carica 1x in ogni pozzu viotu. Questa precaution aiuta à prevene a sparghjera di mostri in i vicini vicini, chì ponu accade se u pozzu hè lasciatu viotu.
Prima di carricà i vostri campioni, cuminciate sempre per aghjunghje un marcatore di pesu moleculare à un pozzu. Questu permette l'identificazione faciule di e dimensioni di a proteina dopu l'elettroforesi.
Controlu di Tensione: Balancing Speed and Resolution
A tensione applicata durante l'elettroforesi affetta direttamente sia a velocità à a quale i campioni migranu à traversu u gel è a risoluzione di a separazione. Per SDS-PAGE, hè cunsigliatu di principià cù una bassa tensione di circa 80V. Questa bassa tensione iniziale permette à i campioni di migrà lentamente è uniformemente, cuncentrali in una banda affilata mentre entranu in u gel di separazione.
Una volta chì i campioni sò entrati cumplettamente in u gel di separazione, a tensione pò esse aumentata à 120V. Questa tensione più alta accelera a migrazione, assicurendu chì e proteine sò siparate in modu efficiente secondu u so pesu moleculare. Hè indispensabile per seguità u prugressu di u fronti di tintura blu di bromofenol, chì indica u cumpletu di l'elettroforesi. Per i gels cun una cuncentrazione di 10-12%, 80-90 minuti sò tipicamenti abbastanza; però, per 15% gels, pudete bisognu di allargà ligeramente u tempu di esecuzione.
Gestione di u tempu: Sapendu quandu si ferma
U timing hè un altru fattore criticu in l'elettroforesi di gel. Eseguisce u gel per un periodu troppu longu o troppu cortu pò purtà à una separazione subottimali. A migrazione di u tintu blu di bromofenol hè un indicatore utile: quandu ghjunghje à u fondu di u gelu, hè di solitu u tempu di piantà a corsa. Per i gels standard, cum'è 10-12%, una durata di l'elettroforesi di circa 80-90 minuti hè tipicamente adatta. Per i geli di percentuale più altu, cum'è 15%, u tempu di esecuzione deve esse allargatu per assicurà a separazione completa di e proteine.
Gestione di Buffer: Riutilizazione è Preparazione di Buffer
U buffer d'elettroforesi pò esse riutilizzatu 1-2 volte, secondu e cundizioni specifiche di u vostru laboratoriu. Tuttavia, per risultati ottimali, hè cunsigliatu di preparà un buffer frescu 10x è dilute appena prima di l'usu. Questu assicura chì u buffer mantene a so efficacità, purtendu à risultati di elettroforesi più affidabili.
Pechino Liuyi Biotechnology prudutti elettroforesi gel
Cuntrollendu currettamente u voluminu di mostra, a tensione è u tempu di l'elettroforesi, pudete migliurà significativamente l'accuratezza è a riproducibilità di i risultati di l'elettroforesi in gel. L'implementazione di queste pratiche megliu in u vostru travagliu di laboratoriu vi aiuterà à ottene bande più chjaru è più distinte, chì portanu à megliu dati per l'analisi downstream.
Sì avete più boni metudi per ottimisà l'esperimentu di l'elettroforesi di gel, benvenutu per discutiri cun noi!
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) hè specializatu in a fabricazione di strumenti per l'elettroforesi per più di 50 anni cù a nostra squadra tecnica prufessiunale è u centru di R & D. Avemu una linea di produzzione affidabile è cumpleta da u disignu à l'ispezione, è u magazzinu, è ancu u supportu di marketing. I nostri prudutti principali sò Electrophoresis Cell (tank / camera), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System etc. Avemu dinù furnisce i strumenti labburatoriu cum'è strumentu PCR, mixer vortex è centrifuge per u laboratoriu.
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Tempu di post: Aug-20-2024