Prétraitement de la membrane d'acétate de cellulose
Membrana di taglio:
Tagliate a membrana acetate cellulosa in dimensioni specifiche basatu nantu à a quantità di campioni separati, tipicamente 2.5cmx11cm o 7.8cmx15cm.
Linea di Applicazione di Campione di Marcatura:
- Nantu à u latu micca brillanti di a membrana, marcate ligeramente a linea di applicazione di mostra cù un lapis.
- U locu di a linea di l'applicazione pò esse sceltu 2-3cm da una estremità di a membrana o qualchì volta vicinu à a linea centrale.
- A pusizione di a linea di applicazione hè di solitu determinata basatu annantu à esperimenti di elettroforesi preliminari.
Immersione in una soluzione tampone di elettrodi:
- In un piattu pocu prufondu o un piattu di cultura, pour in suluzione tampone di l'elettrodu.
- Flottate cù cura a membrana nantu à a superficia di a suluzione di tampone di l'elettrode, assicurendu chì u latu non brillanti hè rivoltu in giru.
- Quandu u fondu di a membrana assorbe a suluzione di tampone di l'elettrodu, scende gradualmente finu à a so sumersione.
Eliminazione è assorbimentu di l'eccessu di liquidu:
- Dopu chì a membrana hà permeatu a suluzione di tampone di l'elettrodu, aduprate pinze blunt per sguassà cun cura.
- Sandwich a membrana trà dui strati di carta di filtru per assorbe l'eccessu di soluzione tampone di l'elettrodu, evitendu una secchezza eccessiva.
- Se una zona bianca opaca appare nantu à a membrana, chì indica un seccu eccessivu, reimmerse a membrana in una soluzione tampone di l'elettrodu è assorbe à u gradu adattatu cù carta di filtru.
Prucessu di applicazione di mostra
Scelta è Operazione nantu à a Linea di Applicazioni di Campione:
Applicà a mostra nantu à a linea di l'applicazione di mostra nantu à u latu micca brillanti di a membrana, di solitu in un mudellu lineare piuttostu cà una applicazione puntuale.
Applicazione di Esempiu di Analisi Qualitativa:
- Aduprate tubi capillari (cù un diametru di 0,5 ~ 1,0 mm) o muffa per l'applicazione di mostra di analisi qualitativa.
- Durante l'analisi qualitativa, immergete a mostra è "timbrala" longu a linea di applicazione di mostra.
Applicazione di campioni di analisi quantitativa:
- Aduprate una siringa di microlitru per l'applicazione di mostra di analisi quantitativa.
- Quandu aduprate un tubu capillare o una siringa di microlitru, movate lisamente su è giù o manca è destra longu a linea di applicazione di mostra finu à chì u voluminu predeterminatu di a mostra hè applicatu.
Cuntrollà e dimensioni di a linea di mostra:
- Dopu l'applicazione di ogni mostra nantu à a membrana, a lunghezza di a linea di mostra hè in generale di 1,5 cm, cù una larghezza generalmente micca più di 4 mm.
- A distanza trà e linee di mostra è trà a linea di mostra è u longu bordu di a membrana hè generalmente 3 ~ 5 mm.
Ajustamentu di u voluminu di mostra:
A quantità o u voluminu di a mostra applicata varieghja significativamente secondu fatturi cum'è a cuncentrazione di mostra, a tintura è i metudi analitici.
Volume di mostra durante l'analisi quantitativa:
Per l'analisi quantitativa, u voluminu di mostra applicata nantu à ogni centimetru di a linea di applicazione di mostra hè generalmente 0.1-0.5μl, equivalente à a quantità di una mostra di proteina 5-1000μg.
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Tempu di post: 30-Jan-2024